light box
امتیاز 2.65 شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی MMP-7">

عنوان فارسی مقاله:شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی MMP-7 در عاج دندان انسان

چکیده

اهداف: ماتریکس متالوپروتئیناز (MMPs)، آنزیم‌های درونزای دندانی هستند که ادعا می‌شود نقش مهمی در تجزیه و تخریب ماتریکس آلی عاج دارند. هدف این مطالعه، بررسی حضور، مکان و توزیع MMP-7 در عاج سالم انسان بود.

 روش‌ها: عاج دندان در بافر ایزوالکتریک فوکوسینگ پودر، دمینرالیزه و حل شد. پروتئین‌های حل شده به غشاهای نیتروسلولز برای تحلیل‌های وسترن بلاتینگ (WB) انتقال یافتند. برای تحلیل زیموگرافیک، نمونه‌های پروتئین عاج در الکتروفورز ژل سولفات-پلی اکریلامید دودسیل سدیم ۱۲ درصد حاوی ژلاتین برچسب گذاری شده فلورسانت تحت الکتروفورز قرار گرفت. به علاوه، غلظت‌های MMP های عاجی با استفاده از ایمنواسی میکروسفر فلورسنت با کیت مولتی پلکس MMP-MAP انسانی اندازه گیری شد. تکنیک برچسب گذاری ایمنی قبل و پس از جایگذاری برای بررسی مکان یابی و توزیع MMP-7 در عاج استفاده شد. عاج با استفاده از انجماد شکسته شد، قطعات به طور جزئی کلسیم زدایی شده و با آنتی MMP-7 مونوکلونال اصلی برچسب گذاری شده و آنتی بادی ثانویه با نانوذرات طلا کانژوگه شد. برچسب گذاری‌های MMP-7 در ماتریکس عاج دمینرالیزه به صورت ذرات طلای با پراکندگی الکترونی بالا شناسایی شدند(شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی).

 نتایج: WB و تحلیل زیموگرافیک پروتئین‌های عاج استخراج شده، MMP7(20-28 کیلودالتون) را نشان داد. به علاوه، MMP-7 در سوپرناتانت های پرتوهای دندانی انکوبات شده با استفاده از ایمنواسی میکروسفر فلورسانت مشاهده شد. تحلیل FEI-SEM و TEM، MMP-7 را به عنوان اجزای تشکیل دهنده‌ی ماتریکس آلی عاج دندان ایجاد کرد.

 نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که MMP-7 جزء درون زای شبکه‌ی فیبریلار عاج انسان است.

 اهمیت بالینی: درک فرایندهای اصلی ریمادلینگ و تجزیه‌ی ماتریکس عاجی به منظور توسعه‌ی پروتکل‌های بالینی بهینه و تضمین افزایش طول عمر عاجی، مهم است.

Title: Biochemical and immunohistochemical identification of MMP-7 in human dentin

Abstract

 Objectives: Matrix metalloproteinases (MMPs) are dentinal endogenous enzymes claimed to have a vital role in dentin organic matrix breakdown. The aim of the study was to investigate presence, localization and distribution of MMP-7 in sound human dentin.
Methods: Dentin was powdered, demineralized and dissolved in isoelectric focusing buffer. Resolved proteins were transferred to nitrocellulose membranes for western blotting (WB) analyses. For the zymographic analysis, aliquots of dentin protein were electrophoresed in 12% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis containing fluorescently labeled gelatin. Further, the concentrations of dentinal MMPs were measured using Fluorescent Microsphere Immunoassay with a human MMP-MAP multiplex kit. Pre- and post-embedding immunolabeling technique was used to investigate the localization and distribution of MMP-7 in dentin. Dentin was cryo-fractured, the fragments partially decalcified and labeled with a primary monoclonal anti-MMP-7 and a secondary antibody conjugated with gold nanoparticles. MMP-7 labelings were identified in the demineralized dentin matrix as highly electron-dense dispersed gold particles.
Results: WB and zymographic analysis of extracted dentin proteins showed presence of MMP-7 (∼20–28 KDa). Further, MMP-7 was found in the supernatants of the incubated dentin beams using Fluorescent Microsphere Immunoassay. FEI-SEM and TEM analyses established MMP-7 as an intrinsic constituent of the human dentin organic matrix.
Conclusion: This study demonstrated that MMP-7 is an endogenous component of the human dentin fibrillar network.  Clinical significance: It is pivotal to understand the underlying processes behind dentin matrix remodeling and degradation in order to develop the most optimal clinical protocols and ensure the longevity of dental restorations.

 

    ثبت دیدگاه

      • دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید توسط تیم مدیریت در وب منتشر خواهد شد.
      • پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
      • پیام هایی که به غیر از زبان فارسی یا غیر مرتبط باشد منتشر نخواهد شد.

    برای ارسال دیدگاه شما باید وارد سایت شوید.

    محصولات مشابه
    اثرات اینترفرون آلفا و درمان سیکلوسپورین به طور جداگانه
    خـریـد محـصـول
    راهنمای ایمنی جاده، راهنمایی برای متخصصان، مدیریت ایمنی جاده، سیستم مدیریت ایمنی
    خـریـد محـصـول
    ساختار کریستال یا بلورین دومین اتصال RNA پروتئین
    خـریـد محـصـول
    اثر روش‌های سنتز بر روی کارایی کاتالیزورهای سه راهه Pt + Rh/Ce0.6Zr0.4O2
    خـریـد محـصـول
    کاتالیزورهای سه راهه xZr1−xO2/Al2O3 Pd/Ce جدید تولید شده با میکرو امولسیون
    خـریـد محـصـول
    تثبیت محلول‌های جامد CeO2-ZrO2 با ساختار نانو با افزایش AL2O3
    خـریـد محـصـول
    اثر ضد میگرنی Δ۹-تتراهیدروکانابینول در موش صحرایی ماده
    خـریـد محـصـول
    کانابیدیول یک روش درمانی بالقوه برای بعد عاطفی-انگیزشی درد پس از عمل
    خـریـد محـصـول
    حساسیت مختص به گونه به تشنج‌های ناشی از مصرف ماری جوانا
    خـریـد محـصـول
    بهینه ساز بادبان ماهی: یک الگوریتم فراابتکاری الهام گرفته از طبیعت جدید
    خـریـد محـصـول
    ثبت اختراع یا انتشار مقاله

    ثبت اختراع یا انتشار مقاله کدام اول باید انجام شود؟ پژوهشگران منابع مالی و غیر مالی بسیاری را صرف انجام تحقیقات و پژوهش ها میکنند و امکان دارد تعدادی از آنها تبدیل به دستاوردها و فناوری های نو گردد. محققان این نتایج را به سرعت در مقالات علمی ملی و بین المللی منتشر و به آن افتخار میکنند. اما باید مد نظر داشت، چنانچه دستاورد پژوهشی امکان تبدیل شدن به یک محصول یا فرآیند قابل استفاده و تولید در صنعت را داشته باشد، هر گونه انتشار عمومی از جمله مقاله باعث از دست رفتن شرط جدید بودن و در نتیجه عدم امکان ثبت فناوری به عنوان اختراع خواهد شد.

    در نتیجه محققان و پژوهشگران باید پیش از هرگونه افشاء عمومی آن دسته از نتایج تحقیقاتی که شرایط ثبت اختراع را دارا می باشد به صورت اظهارنامه اختراع در اداره مربوطه ثبت و سپس نسبت به انتشار آنها اقدام کنند. امکان دارد مراحل ثبت اختراع چندین ماه به طول بیانجامد که انتشار مقاله (و مانند آن) پس از تاریخ ثبت اظهارنامه اختراع مشکلی را در فرآیند ثبت اختراع بوجود نمی آورد.

    از آنجا که برخی دستاورد ها مانند روشهای تشخیص بیماری و نوآوری های مدیریتی قابلیت ثبت اختراع بین المللی و ملی را ندارند، محققان بدون نگرانی میتوانند انتشار در مقالات داخلی و خارجی را به عنوان اولین گزینه جهت کسب افتخار دست یابی به این قبیل پژوهشها انتخاب کنند.

    برو بالا