light box
امتیاز 2.65 شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی MMP-7">

عنوان فارسی مقاله:شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی MMP-7 در عاج دندان انسان

چکیده

اهداف: ماتریکس متالوپروتئیناز (MMPs)، آنزیم‌های درونزای دندانی هستند که ادعا می‌شود نقش مهمی در تجزیه و تخریب ماتریکس آلی عاج دارند. هدف این مطالعه، بررسی حضور، مکان و توزیع MMP-7 در عاج سالم انسان بود.

 روش‌ها: عاج دندان در بافر ایزوالکتریک فوکوسینگ پودر، دمینرالیزه و حل شد. پروتئین‌های حل شده به غشاهای نیتروسلولز برای تحلیل‌های وسترن بلاتینگ (WB) انتقال یافتند. برای تحلیل زیموگرافیک، نمونه‌های پروتئین عاج در الکتروفورز ژل سولفات-پلی اکریلامید دودسیل سدیم ۱۲ درصد حاوی ژلاتین برچسب گذاری شده فلورسانت تحت الکتروفورز قرار گرفت. به علاوه، غلظت‌های MMP های عاجی با استفاده از ایمنواسی میکروسفر فلورسنت با کیت مولتی پلکس MMP-MAP انسانی اندازه گیری شد. تکنیک برچسب گذاری ایمنی قبل و پس از جایگذاری برای بررسی مکان یابی و توزیع MMP-7 در عاج استفاده شد. عاج با استفاده از انجماد شکسته شد، قطعات به طور جزئی کلسیم زدایی شده و با آنتی MMP-7 مونوکلونال اصلی برچسب گذاری شده و آنتی بادی ثانویه با نانوذرات طلا کانژوگه شد. برچسب گذاری‌های MMP-7 در ماتریکس عاج دمینرالیزه به صورت ذرات طلای با پراکندگی الکترونی بالا شناسایی شدند(شناسایی بیوشیمیایی و ایمنوهیستوشیمی).

 نتایج: WB و تحلیل زیموگرافیک پروتئین‌های عاج استخراج شده، MMP7(20-28 کیلودالتون) را نشان داد. به علاوه، MMP-7 در سوپرناتانت های پرتوهای دندانی انکوبات شده با استفاده از ایمنواسی میکروسفر فلورسانت مشاهده شد. تحلیل FEI-SEM و TEM، MMP-7 را به عنوان اجزای تشکیل دهنده‌ی ماتریکس آلی عاج دندان ایجاد کرد.

 نتیجه گیری: این مطالعه نشان داد که MMP-7 جزء درون زای شبکه‌ی فیبریلار عاج انسان است.

 اهمیت بالینی: درک فرایندهای اصلی ریمادلینگ و تجزیه‌ی ماتریکس عاجی به منظور توسعه‌ی پروتکل‌های بالینی بهینه و تضمین افزایش طول عمر عاجی، مهم است.

Title: Biochemical and immunohistochemical identification of MMP-7 in human dentin

Abstract

 Objectives: Matrix metalloproteinases (MMPs) are dentinal endogenous enzymes claimed to have a vital role in dentin organic matrix breakdown. The aim of the study was to investigate presence, localization and distribution of MMP-7 in sound human dentin.
Methods: Dentin was powdered, demineralized and dissolved in isoelectric focusing buffer. Resolved proteins were transferred to nitrocellulose membranes for western blotting (WB) analyses. For the zymographic analysis, aliquots of dentin protein were electrophoresed in 12% sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis containing fluorescently labeled gelatin. Further, the concentrations of dentinal MMPs were measured using Fluorescent Microsphere Immunoassay with a human MMP-MAP multiplex kit. Pre- and post-embedding immunolabeling technique was used to investigate the localization and distribution of MMP-7 in dentin. Dentin was cryo-fractured, the fragments partially decalcified and labeled with a primary monoclonal anti-MMP-7 and a secondary antibody conjugated with gold nanoparticles. MMP-7 labelings were identified in the demineralized dentin matrix as highly electron-dense dispersed gold particles.
Results: WB and zymographic analysis of extracted dentin proteins showed presence of MMP-7 (∼20–28 KDa). Further, MMP-7 was found in the supernatants of the incubated dentin beams using Fluorescent Microsphere Immunoassay. FEI-SEM and TEM analyses established MMP-7 as an intrinsic constituent of the human dentin organic matrix.
Conclusion: This study demonstrated that MMP-7 is an endogenous component of the human dentin fibrillar network.  Clinical significance: It is pivotal to understand the underlying processes behind dentin matrix remodeling and degradation in order to develop the most optimal clinical protocols and ensure the longevity of dental restorations.

 

    ثبت دیدگاه

      • دیدگاه های ارسال شده توسط شما، پس از تایید توسط تیم مدیریت در وب منتشر خواهد شد.
      • پیام هایی که حاوی تهمت یا افترا باشد منتشر نخواهد شد.
      • پیام هایی که به غیر از زبان فارسی یا غیر مرتبط باشد منتشر نخواهد شد.

    برای ارسال دیدگاه شما باید وارد سایت شوید.

    محصولات مشابه
    تأثیر شیوه های مدیریتی زنجیره تأمین سبز بر پایداری محیط زیست: کارخانه های تولید پوشاک آماده بنگلادش
    خـریـد محـصـول
    پیشرفت‌های حاصل شده در روشهای فرآوری مواد اومامی: یک مقاله‌ی مروری
    خـریـد محـصـول
    جغرافیای انگ: روش‌های تجربی برای تعیین مجازات و تاوان مکان
    خـریـد محـصـول
    بررسی شیوه‌های استخراج کلاژن به منظور تجزیه تحلیل ایزوتوپ‌های پایدار در تحقیقات رژیم غذایی
    خـریـد محـصـول
    دلبستگی والدین ، وابستگی عاشقانه بزرگسالان و کودکان و رضایت زناشویی: بررسی زمینه های فرهنگی
    خـریـد محـصـول
    الگوهای دلبستگی(وابستگی) والدین در مادران کودکان مبتلا به اختلال اضطراب
    خـریـد محـصـول
    استراتژی‌های تمایز و عملکرد بانک‌های پول سپرده گذاری در بندر هارکورت، نیجریه
    خـریـد محـصـول
    تأثیر زکات تولید در افزایش درآمد در کاهش فقر جامعه در آچه اندونزی
    خـریـد محـصـول
    مروری بر راه حل‌های اینترنت اشیا برای کنترل انرژی هوشمند در ساختمان‌ها برای کاربردهای شهر هوشمند
    خـریـد محـصـول
    تحلیل محتوای صندوق های سرمایه گذاری مطابق با شرع در KSA: آیا عدالت اجتماعی مهم است ؟
    خـریـد محـصـول
    ثبت اختراع یا انتشار مقاله

    ثبت اختراع یا انتشار مقاله کدام اول باید انجام شود؟ پژوهشگران منابع مالی و غیر مالی بسیاری را صرف انجام تحقیقات و پژوهش ها میکنند و امکان دارد تعدادی از آنها تبدیل به دستاوردها و فناوری های نو گردد. محققان این نتایج را به سرعت در مقالات علمی ملی و بین المللی منتشر و به آن افتخار میکنند. اما باید مد نظر داشت، چنانچه دستاورد پژوهشی امکان تبدیل شدن به یک محصول یا فرآیند قابل استفاده و تولید در صنعت را داشته باشد، هر گونه انتشار عمومی از جمله مقاله باعث از دست رفتن شرط جدید بودن و در نتیجه عدم امکان ثبت فناوری به عنوان اختراع خواهد شد.

    در نتیجه محققان و پژوهشگران باید پیش از هرگونه افشاء عمومی آن دسته از نتایج تحقیقاتی که شرایط ثبت اختراع را دارا می باشد به صورت اظهارنامه اختراع در اداره مربوطه ثبت و سپس نسبت به انتشار آنها اقدام کنند. امکان دارد مراحل ثبت اختراع چندین ماه به طول بیانجامد که انتشار مقاله (و مانند آن) پس از تاریخ ثبت اظهارنامه اختراع مشکلی را در فرآیند ثبت اختراع بوجود نمی آورد.

    از آنجا که برخی دستاورد ها مانند روشهای تشخیص بیماری و نوآوری های مدیریتی قابلیت ثبت اختراع بین المللی و ملی را ندارند، محققان بدون نگرانی میتوانند انتشار در مقالات داخلی و خارجی را به عنوان اولین گزینه جهت کسب افتخار دست یابی به این قبیل پژوهشها انتخاب کنند.

    در اولین مرحله از شروع یک تحقیق جدید نیاز است منابع مختلفی جستجو شود تا جدید بودن ایده مورد بررسی قرار گیرد. یکی از بهترین منابع جهت جستجو، جستجوی اختراع های ثبت شده است. پایگاه های جستجوی پتنت به محقق کمک میکند پیشینه تحقیق خود را مورد بررسی قرار دهد تا مطمئن شود کار تکراری انجام نمیدهد. لیست اختراعات ثبت شده در ایران در طبقه بندی بین المللی A که شامل اختراعات حوزه نیاز ها بشری شامل کشاوری، مواد غذایی، کالاهای خانگی یا شخصی، بهداشت و سرگرمی را میتوانید در پایگاه جستجوی دارایی های فکریدارکوب مشاهده کنید.
    برو بالا